猪传染性胃肠炎病毒间接免疫荧光检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱蕴暖

作者： 朱蕴暖;张鑫;朱向东;陈建飞;时洪艳;石达;王鑫;季朝阳;冯力

作者机构：

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒;间接免疫荧光方法;抗TGEV N蛋白单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2017 年 01 期

页码： 109-113

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)直观、特异和快速的检测方法,将TGEV接种PK-15细胞后,以抗TGEV N蛋白的单克隆抗体为一抗,荧光素FITC标记的山羊抗小鼠Ig G为二抗,建立了TGEV的间接免疫荧光(IFA)检测方法。结果显示,TGEV的最佳接种效价为1×102TCID50,培养时间为24 h,细胞最佳固定液为40 m L/L多聚甲醛,最佳封闭条件为10 g/L BSA 37℃封闭30 min,一抗的最佳使用浓度为1 ng/L,二抗的最佳稀释度为1∶100。对常见的猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒和猪圆环病毒2型等猪病病原检测均为阴性。结果表明,建立的检测方法对TGEV具有良好的特异性。本研究建立的方法为TGEV的实验室诊断及TGEV在感染细胞中的定位和动态分布提供了有效的检测手段。

分类号： S858.28

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