猪干扰素-γ基因的表达、纯化及活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 潘晓梅

作者： 潘晓梅;窦永喜;骆学农;刘琼;张冬峰;岳城;才学鹏

作者机构：

关键词： 猪IFN-γ;表达;蛋白纯化;活性分析

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2009 年 44 卷 02 期

页码： 13-18+31

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 依照猪IFN-γ基因序列设计引物,将该基因克隆至原核表达载体pET-30a,构建pET-30a-pIFN-γ重组表达载体,转化入寄主菌BL21(DE3),经PCR、双酶切、测序鉴定正确后,用IPTG进行诱导表达,可溶性的表达产物分别经镍柱和Sephadex-G100纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化,然后进行SDS-PAGE、Western-blot分析,并用细胞病变抑制法进行重组猪IFN-γ活性测定.结果表明:试验得到了高纯度的重组pIFN-γ,且纯化的重组猪IFN-γ蛋白具有较高的干扰病毒复制的活性,对PRV的活性为2.0×103U.mg-1,而对标准O型口蹄疫病毒的活性为2.56×105U.mg-1.

分类号： S852.5

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