禽呼肠孤病毒σC基因在杆状病毒表达系统中的表达及其活性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙美玉

作者： 孙美玉;秦立廷;高玉龙;祁小乐;高宏雷;王永强;王笑梅

作者机构：

关键词： 禽呼肠孤病毒;σC基因;sf9细胞;杆状病毒

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2011 年 04 期

页码： 353-357

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建重组禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)σC基因的杆状病毒,感染sf9细胞获得表达重组蛋白。首先,将ARVσC基因克隆至pFastBacHTA载体,构建重组供体载体pFσC,将其转化大肠杆菌DHl0Bac感受态细胞,使σC基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidσC。通过脂质体介导将其转染到sf9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒rBacσC。通过Western Blot、间接免疫荧光试验(IFA)进行检测,结果显示:σC蛋白在重组杆状病毒rBacσC感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达,分子质量约为37kD,表达的σC蛋白具有良好的反应活性。

分类号： S852.65

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