川续断ISSR反应体系的建立与优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 卢超

作者： 卢超;艾伦强;张美德;何银生;刘海华

作者机构：

关键词： ISSR;分子标记;川续断;体系优化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2017 年 15 卷 09 期

页码： 3579-3585

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用两轮混合均匀设计的方法,研究引物、2×Taq master mix、模板DNA以及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响,在此基础上获得优化的川续断ISSR反应体系,为后续开展川续断的遗传多样性分析奠定基础。试验显示川续断ISSR-PCR最佳反应体系为:在18μL的反应体系中含有2×Taq Master Mix 10.44μL,模板DNA 45 ng,引物0.35μmol/L。在此基础上,从100条引物中筛选出5条扩增较稳定、多态性丰富的引物,随后进行的温度梯度PCR实验发现引物最佳退火温度介于45℃~58℃之间。该试验表明采用混合均匀设计和单因素试验相结合的方法,可以减少实验处理次数,快速建立ISSR反应体系,经过对9份川续断种质资源进行ISSR扩增检测,证明该体系稳定可靠,可用于川续断遗传多样性分析。

分类号： S567.239

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