兔出血症病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王芳

作者： 王芳;李超美;杨龙圣;徐为中;张则斌;侯玉峰;陈国强;何孔旺

作者机构：

关键词： 兔出血症病毒(RHDV);RT-PCR;病毒分布

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2007 年 15 卷 03 期

页码： 409-413

收录情况： CSCD

摘要： 按照GenBank上公布的兔出血症病毒(RHDV)基因序列设计1对引物,以RHDV发病兔的新鲜肝为材料,提取总RNA,进行cDNA的合成和PCR扩增,结果能扩增出与预期的269bp大小一致的片段,该产物序列与公布的RHDV基因序列同源性95.8%～98.5%。该方法可特异性地检测出RHDV,其最小检出RHDV的RNA浓度为1.66ngμL,敏感性为血凝试验(HA)的4×104倍,表明已成功地建立了RHDVRT-PCR检测方法。用该方法和HA对兔出血症发病兔各组织脏器进行检测,结果表明,在检测发病死亡兔各脏器中,HA检测阳性的病料为肝脏、肾脏、脾脏、血液和肺,而RT-PCR检测除粪便外,其它均为阳性;该方法还能够检测出-20℃保存12个月的阳性病料。表明RT-PCR方法检测RHDV特异性强、敏感度高、重复性好,不仅可用于RHD临床诊断和流行病学调查,而且在兔肉等兔类产品的检疫方面具有很好的应用前景。

分类号： S854.43

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