文献类型: 中文期刊
第一作者: 夏鹏
作者: 夏鹏;魏建超;陆莹梅;武专昌;李蓓蓓;刘珂;邵东华;邱亚峰;钟登科
作者机构:
关键词: 裂谷热病毒;Gn蛋白;原核表达;蛋白纯化
期刊名称: 中国人兽共患病学报
ISSN: 1002-2694
年卷期: 2015 年 31 卷 07 期
页码: 607-611
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的通过原核表达系统制备裂谷热病毒Gn片段主要抗原区蛋白,获取纯化蛋白,并分析抗原性。方法将合成的裂谷热Gn基因用PCR的方法扩增具有保护性抗原表位的两段Gn1和Gn2,并将其定向插入原核表达质粒pColdⅠ中,构建重组表达质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并将重组质粒转化到BL21(DE3)感受态中,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白和表达量,并利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果所构建的质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正确,SDS-PAGE检测到目的蛋白,Western-blot显示截断的Gn蛋白具有很好反应原性。结论成功纯化了裂谷热病毒Gn主要抗原区的表达蛋白。
分类号: R373
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