辽宁绒山羊DLX3毛囊表达载体的构建及其转染成纤维细胞的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 舒国涛

作者： 舒国涛;姚娜;董坤哲;康晔;浦亚斌;赵倩君;何晓红;马月辉

作者机构：

关键词： DLX3;绒山羊;成纤维细胞;真核表达载体

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2014 年 41 卷 11 期

页码： 29-34

收录情况： 北大核心

摘要： 根据GenBank中已发表的DLX3基因(登录号:XM_005694267.1)序列设计引物,以辽宁绒山羊毛囊生长期皮肤组织cDNA为模板,采用RT-PCR方法,扩增出DLX3基因的CDS区,连接平末端载体并验证后与真核表达载体pIRES2-EGFP连接。真核表达载体经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定后,通过脂质体法转染绒山羊耳源成纤维细胞,在荧光显微镜下观察细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,并通过RT-PCR和Western blotting技术检测目的基因转录、蛋白质表达情况。结果表明,成功克隆了绒山羊DLX3基因,并构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-DLX3。重组质粒转染绒山羊成纤维细胞24h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,通过RT-PCR扩增909bp的转录产物,并利用Western blotting检测到32.87ku目的蛋白DLX3的表达。本试验结果为研究DLX3基因在绒山羊毛囊生长周期内的功能以及调控毛囊生长发育的机制奠定了基础。

分类号： S827

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