新型cry7Ab基因的鉴定、克隆、表达与杀虫活性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邓淑

作者： 束长龙;林毅;宋福平;张杰

作者机构：

关键词： 苏云金芽胞杆菌;cry7Ab4基因;克隆表达;杀虫活性

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 05 期

页码： 168-169+171-173

收录情况： 北大核心

摘要： 应用PCR-RFLP法鉴定出苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)HQ40中含有cry7Ab基因,并根据cry7A全长基因序列设计特异性引物,成功地克隆了该基因。该基因核苷酸序列已在GenBank中登录,登录号为EU380678,并由Btδ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为cry7Ab4。通过穿梭载体pSTK将该基因导入Bt无晶体突变株中,获得工程菌HD7Ab4。SDS-PAGE分析表明,cry7Ab4基因在其中能正常表达,并形成菱形晶体。提取工程菌HD7Ab4和野生菌HQ40晶体蛋白,并在体外用胰蛋白酶酶解活化。分别对直翅目、鳞翅目和鞘翅目的害虫进行了杀虫活性测定。结果表明,Cry7Ab4蛋白trypsin酶解液对鞘翅目的大猿叶甲(Colophellus bowringi)显示了一定的杀虫活性,其野生菌蛋白及表达蛋白酶解液LC50分别为231.59μg/mL和293.79μg/mL。但对鳞翅目的小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spadoptera exigua)、亚洲玉米螟(Ostrinia fur-nacalis)、马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)、榆蓝叶甲(Pyrrhalta aenescens)和直翅目的东亚飞蝗(Oroental migratory locust)基本无杀虫活性。

分类号： S188`S476

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