A型口蹄疫病毒VP1蛋白间接ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 卢清侠

作者： 卢清侠;刘畅;郭官鹏;邢广旭;刘运超;邓瑞广;张改平

作者机构：

关键词： A型口蹄疫病毒;VP1蛋白;间接ELISA

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2014 年 23 卷 01 期

页码： 30-35

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以原核表达经纯化复性制备的A型口蹄疫病毒(FMDV)VP1蛋白代替传统病毒抗原包被,建立快速、安全、有效的A型FMDV抗体ELISA检测方法。对前期制备的A型VP1蛋白进行Western-Blot检测,结果表明,VP1蛋白能够特异性识别A型FMDV阳性牛血清,可作为检测抗原建立检测A型FMDV抗体的方法。以最佳质量浓度1mg/L VP1蛋白为检测抗原,方阵滴定法确定最佳检测血清稀释度为1∶50[V(血清)∶V(封闭液)],最佳的酶标二抗稀释度为1∶2 000[V(酶标二抗)∶V(封闭液)],建立A型FMDV抗体ELISA检测方法。该方法的敏感性为94.32%,特异性为99.09%,批内与批间重复试验变异系数均小于8%。采用该方法检测201份临床血清,与液相阻断ELISA试剂盒的符合率达92.54%。研制的VP1-ELISA试剂盒特异、敏感、稳定、操作简便,可用来监控A型口蹄疫抗体水平。

分类号： S852.65

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