文献类型： 中文期刊
第一作者： 孙慧敏
作者： 孙慧敏;仇华吉;李素;李永锋
作者机构：
关键词： 猪瘟病毒;Venus基因;重组病毒;稳定性;荧光强度;感染效率
期刊名称： 黑龙江畜牧兽医
ISSN： 1004-7034
年卷期： 2020 年 020 期
页码： 67-71,80,158-159
收录情况： 北大核心
摘要： 为了利用CRISPR/Cas9技术高通量筛选介导猪瘟病毒入侵的功能性受体,试验首先用融合PCR技术,将Venus基因融合至Npro蛋白的第13位与14位氨基酸之间,获得全长感染性克隆pCSFV-Venus;之后将pCSFV-Venus转染至SK6细胞拯救重组猪瘟病毒(rCSFV-Venus),并将拯救的病毒感染猪肾细胞(PK-15细胞)进行连续传代观察其稳定性;最后将rCSFV-Venus和表达EGFP的重组病毒rCSFV-EGFP以相同剂量感染PK-15细胞,通过流式细胞仪分析荧光强度及感染效率.结果表明:rCSFV-Venus全长感染性克隆构建成功;转染后传至第4代可观察到绿色荧光,表明重组病毒拯救成功;将拯救的病毒连续传代10代,每代感染的PK-15细胞都可观察到绿色荧光,表明重组病毒具有良好的稳定性;流式细胞仪分析结果表明,rCSFV-Venus比rCSFV-EGFP荧光强度强且感染效率高.说明本研究成功拯救了稳定表达Venus基因的rCSFV-Venus,为筛选介导CSFV入侵的功能性受体提供了有力工具.
分类号： S852.651
- 相关文献
[1]重组猪瘟病毒C株E2蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒的构建及鉴定. 高飞,曲泽慧,姜一峰,李丽薇,虞凌雪,周艳君,杨莘,夏天奇,郑海红. 2015
[2]表达猪瘟病毒E2蛋白重组猪繁殖与呼吸道综合征病毒的研究. 童武,周艳君,徐彦召,姜一峰,王亚欣,张善瑞,朱建平,虞凌雪,孙晶,陈焕春,童光志. 2012
[3]表达靶向禽流感病毒多靶点miRNA重组慢病毒的制备及病毒感染效率检测. 田进,张在平,孟庆文,谭复善,崔雷. 2010
[4]市售褐色酸奶在不同贮藏条件下美拉德反应副产物变化规律. 毕日秀,芦晶,张书文,逄晓阳,胡诚,于景华,吕加平. 2021
[5]FAST指数在复原乳区分中的应用初探. 卜登攀,李树聪,张瑞超,周凌云,于建国,魏宏阳,王加启. 2006
[6]基于荧光法快速判定巴氏杀菌乳和超高温灭菌乳. 徐瑾钰,张雨萌,王筠钠,谢宁,李旭,逄晓阳,吕加平,张书文. 2024
[7]城市公园景观水体上覆水溶解性有机质荧光光谱特征. 史传奇,李艳,魏丹,陈曦,李子为. 2025
[8]表达O型口蹄疫病毒VP1中和表位的重组猪圆环病毒2型毒株的构建及其生物学特性. 张飞雁,唐青海,黄立平,危艳武,吴洪丽,郭龙军,付玉洁,刘长明. 2012
[9]山羊痘病毒非必需基因区gp024基因的鉴定. 雷震,王芳,马文戈,黄炯,符子华,于力,冉多良. 2009
[10]重组伪狂犬病病毒的研究进展. 张传健,刘娅梅,侯继波,王继春. 2020
[11]猪圆环病毒2型标签重组病毒构建和免疫试验. 华涛,唐波,常晨,刘国阳,张雪花,于漾,侯继波,张道华. 2018
[12]口蹄疫O型重组病毒的构建及其免疫原性分析. 黄书伦,查晶晶,孙普,章兴赜,李冬,曹轶梅,白兴文,付元芳,马雪青,李坤,袁红,卢曾军,刘在新,李平花. 2024
[13]狂犬病毒反向遗传学技术的研究及应用进展. 任林柱,史利军. 2009
[14]猪蓝耳病病毒反向遗传操作及应用. 袁世山,孙志,高飞,吕键,王小敏,庄金山,李祥健,张建武,郑海红,余丹丹,谭菲菲,刘长龙,袁海峰,丛雁芳,韦祖樟. 2008
[15]表达O型口蹄疫病毒保护性抗原表位重组PRRSV的构建及其鉴定. 童武,陈焕春,童光志,徐彦召,周艳君,姜一峰,张善瑞,王亚欣,朱建平,虞凌雪,孙晶. 2012
[16]杆状病毒表达系统研究进展及在寄生虫基因工程疫苗中的应用前景. 景志忠,王佩雅,才学鹏. 2001
[17]表达O型口蹄疫VP1中和表位的重组猪圆环病毒2型毒株的构建及其生物学特性鉴定. 张飞雁,唐青海,黄立平,危艳武,吴洪丽,郭龙军,付玉洁,刘长明. 2012
[18]猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒反向遗传操作系统的建立及应用. 袁世山,孙志,余丹丹,高飞,吕键,袁海峰,郑海红,谭菲菲,张建武. 2007
[19]非洲猪瘟病毒F334L基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体制备. 刘佳晨,李丽薇,郭子强,陈金霞,曹云雷,乔思娜,刘长龙,赵冉,童光志,高飞. 2024
[20]伪狂犬病病毒gE/TK基因缺失突变株的构建. 田志军,仇华吉,倪健强,周艳君,王云峰,童光志. 2004
作者其他论文 更多>>
-
抗原表位鉴定的新方法及其递送系统的研究进展
作者：高玉璇;翟焕杰;宋鑫;李树稳;仇华吉;李永锋
关键词：表位疫苗;B细胞表位;T细胞表位;递送系统
-
非洲猪瘟病毒消毒策略及活病毒鉴别检测技术研究进展
作者：樊高成;高晓薇;杨玉莹;罗玉子;仇华吉
关键词：非洲猪瘟病毒;活病毒鉴别;消毒
-
非洲猪瘟病毒毒力相关基因的鉴定及其功能研究进展
作者：蓝靖;陆战豪;罗瑞;宋鑫;孙元;杨玉莹;王涛;仇华吉
关键词：非洲猪瘟;非洲猪瘟病毒;毒力相关基因;减毒活疫苗;致病机制
-
生物安全在养猪业的发展与应用
作者：李树稳;李永锋;张交儿;孙元;张新;黄淑坚;仇华吉
关键词：生物安全;养猪业;疾病预防;发展;生物安全规范
-
伪狂犬病病毒在小鼠原代神经细胞中潜伏感染模型的建立
作者：向广韬;吴红霞;王异民;周末;王亚林;王翌;尹航;仇华吉;孙元
关键词：伪狂犬病毒;小鼠背根神经节;潜伏感染;再激活;模型
-
非洲猪瘟病毒的流行与遗传演化:变与不变
作者：陈盛媚;王涛;陆战豪;蓝靖;罗瑞;付强;孙元;仇华吉
关键词：非洲猪瘟;非洲猪瘟病毒;基因突变;重组;遗传演化;疫苗
-
用于传染病诊断的新型检测技术
作者：高晓薇;宋浩;仇华吉;罗玉子
关键词：新型检测技术;传染病;研究进展
