牦牛β-干扰素基因的克隆与表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李玉萍

作者: 李玉萍;景志忠;蒲训;窦永喜;陈国华

作者机构:

关键词: β-干扰素;牦牛;基因克隆;同源性;分子进化树;表达

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2006 年 36 卷 01 期

页码: 40-45

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 提取经植物血凝素(PHA)诱导培养的牦牛外周血淋巴细胞总RNA,采用RT-PCR技术扩增并克隆了牦牛IFN-β基因,经PCR和酶切鉴定及测序分析,再克隆到pGEX-4T-1质粒载体中,构建了原核表达重组载体,经IPTG诱导表达重组蛋白,可表达约41 ku的牦牛IFN-β融合蛋白,主要以包涵体形式存在。序列分析结果表明,牦牛IFN-β基因ORF为498 bp,与乳牛IFN-β参考序列的同源性高达98.6%,与猪、马、猫、人IFN-β基因的同源性分别为72.5%、68.9%、66.1%和63.5%,而与狗、鼠、鸡等动物的同源性均不超过25%;分子遗传进化树分析也表明,牦牛与乳牛IFN-β基因的亲缘关系最近,而与鼠、狗、鸡等的亲缘关系较远,说明IFN-β基因有种属差异性。

分类号: S852.4

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