玉米弯孢病病原菌ISSR-PCR反应体系的建立及优化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 陈丹

作者: 陈丹;张晓芳

作者机构:

关键词: 玉米弯孢病菌;ISSR-PCR;体系优化

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2017 年 S1 期

页码: 64-68

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了对玉米弯孢病菌的鉴定、区域发生关系以及遗传多样性等进行研究,采用单因素试验优化玉米弯孢叶斑病菌ISSR-PCR反应体系中模板DNA、引物、dNTPs、Taq酶、Mg~(2+)的用量,并确定每条引物的最佳退火温度。结果表明,最佳反应体系为:模板DNA 1.6μL(25 ng/μL)、引物1.4μL(5μmol/L)、dNTPs 0.25μL(2.5 mmol/L)、Taq酶0.4μL(2.5 U/μL)、Mg~(2+)0.8μL(25 mmol/L)、10×Taq Buffer 2μL、dd H2O 13.55μL。在该体系下选用3个玉米弯孢病菌的全基因组DNA,分别对52条ISSR引物进行筛选,筛选出16条多态性高、扩增稳定的ISSR引物。玉米弯孢病菌ISSR-PCR反应体系的建立为利用ISSR分子标记技术对该病原菌进行遗传分析奠定了基础。

分类号: S435.131

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