家蚕微孢子RAD51基因的克隆、原核表达与体外翻译

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高永珍

作者： 高永珍;黄可威;常智杰

作者机构：

关键词： 家蚕微孢子;RAD51基因;序列

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2003 年 29 卷 01 期

页码： 58-65

收录情况： CSCD

摘要： 从家蚕微孢子 (Nosemabombycis)中通过RT PCR扩增出RAD5 1(DNArepairprotein)基因的 3′端部分序列 ,经5′ RACE(RapidAmplificationofcDNAEnds)后得到全长cDNA序列 ,共 10 0 2bp ,编码 334个氨基酸。虽然用NorthernBlot检测不出mRNA的特异性表达带 ,但用RT -PCR直接扩增出全长cDNA而证实了该基因。该cDNA已作为新基因提交到GenBank数据库中 ,登录号为AF0 3730 5。将该基因在大肠杆菌 (E .coli)中进行表达 ,得到表达量较高的分子量约 37ku的蛋白质 ,经亲和层析纯化后得到较浓的单一蛋白带 ,纯化效果较好。用兔网织红细胞裂解液在体外也翻译出该分子量为 37ku的蛋白质 ,进一步确证了该蛋白。通过BLAST查询GenBank数据库 ,发现它与许多生物体的RAD5 1同源性很高

分类号： S884

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