基于牛结节性皮肤病病毒ORF61基因荧光定量检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马春玲

作者： 马春玲;任善会;杨雪;蔺玉刚;李积雲;王相伟;殷相平;孙跃峰;万学瑞;陈豪泰

作者机构：

关键词： 牛结节性皮肤病病毒;ORF61;MGB探针;荧光定量PCR

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 1800-1809

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒（lumpy skin disease virus, LSDV）的基因组序列，建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物，并进行特异性和灵敏性筛选验证。最终，筛选得到靶向于LSDV ORF61基因的一对qPCR引物；利用pCAGGS-ORF61真核表达质粒，获得标准曲线y=-3.287 5x+47.87,线性相关系数R~2=0.998 6,扩增效率达101%;荧光定量PCR特异性、重复性和灵敏性试验结果表明，该引物的特异性高、重复性良好和灵敏度高等优点；该引物的最低检测限为6.71拷贝·μL-1,各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%。以上结果表明，作者建立特异性LSDV的荧光定量PCR检测方法，为LSD预防和控制提供有效的检测手段。

分类号： S852.653

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