苹果叶片叶绿体分离及其蛋白提取、双向电泳方法的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 肖龙

作者： 肖龙;张彩霞;张利义;田义;宗泽冉;丛佩华

作者机构：

关键词： 苹果;叶片;叶绿体蛋白;提取方法;双向电泳

期刊名称： 果树学报

ISSN： 1009-9980

年卷期： 2016 年 06 期

页码： 752-761

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】筛选苹果叶片叶绿体及其蛋白的提取方法,建立叶绿体蛋白双向电泳分离技术体系。【方法】以苹果叶片为试材,采用4种Percoll密度梯度离心法提取苹果叶片叶绿体,检测提取叶绿体的完整度、纯度及提取率。采用酚抽提法、改良酚抽提法提取叶绿体蛋白,检测蛋白样品的质量。优化胶条长度、上样量、等电聚焦程序、分离胶浓度等双向电泳条件。【结果】Percoll密度梯度离心法D提取的叶绿体纯度高、提取率高,优于其他3种方法;改良酚抽提法提取的叶绿体蛋白,经2-DE分离所得蛋白点数多、分离效果好,优于酚抽提法。蛋白样品经优化后的双向电泳体系分离,获得了较为理想的2-DE图谱。【结论】Percoll密度梯度离心法D、改良酚提法适于苹果叶片叶绿体及其蛋白的提取。苹果叶片叶绿体蛋白使用优化后的双向电泳体系进行分离,可以获得比较理想的2-DE图谱。

分类号： S661.1

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