网状内皮组织增生病病毒反向遗传操作系统的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邓小芸

作者： 邓小芸;祁小乐;高玉龙;高宏雷;秦立廷;高立;王永强;王笑梅

作者机构：

关键词： 网状内皮组织增生病;感染性分子克隆;病毒拯救

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2010 年 11 卷 09 期

页码： 659-663

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立网状内皮组织增生病病毒(REV)的反向遗传操作系统,本研究分别以6个含有连续并且部分重叠的REV HLJR0901株基因组片段的重组质粒为模板,通过重叠延伸PCR(SOE PCR)和酶切拼接将HLJR0901的全基因组克隆于pBluescriptⅡ载体中,并在基因组中通过改变核苷酸(C2250G)消除了其中的MscⅠ酶切位点作为分子标签,构建了REV感染性分子克隆pBlu-mHLJR0901。测序结果表明,REV HLJR0901株前病毒DNA全长为8284bp。将pBlu-mHLJR0901转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒拯救,间接免疫荧光、PCR、测序及电镜观察表明拯救出REV。其拯救的REV在CEF细胞上具有与亲本毒相似的复制特性。该反向遗传操作系统的建立为REV的深入研究提供了有效的技术操作平台。

分类号： S852.65

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