蔬菜中黄瓜花叶病毒的RT-LAMP快速检测

文献类型: 中文期刊

第一作者: 赵雪君

作者: 赵雪君;邓永杰;魏周玲;张旺;黄国联;李斌;陈德鑫;青玲;孙现超

作者机构:

关键词: 黄瓜花叶病毒;蔬菜;外壳蛋白基因;反转录环介导等温扩增技术;检测

期刊名称: 园艺学报

ISSN: 0513-353X

年卷期: 2016 年 43 卷 06 期

页码: 1203-1210

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了建立黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)可视化的反转录环介导等温扩增(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测体系,根据CMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因核苷酸序列设计4条引物,优化了RT-LAMP反应体系中的d NTPs和Mg~(2+)浓度、反应温度和反应时间,同时对体系进行了特异性和灵敏性的测定。最终确定RT-LAMP的最优反应体系为d NTPs 1.2 mmol·L~(-1),Mg~(2+)6 mmol·L~(-1),在61℃的条件下反应40 min。该RT-LAMP体系比RT-PCR反应体系的灵敏度高100倍,并且反应产物可以通过将反应管快速离心后观察底部沉淀或通过加入SYBR GreenⅠ后的显色反应进行结果判定。该RT-LAMP检测体系可以对多种蔬菜的CMV进行高效快速的检测,操作简便,花费较小,十分适合生产上检测CMV使用。

分类号: S432.41

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