鸭多杀性巴氏杆菌外膜蛋白A基因表达及抗原性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙龚

作者： 孙龚;郭东春;刘家森;姜骞;司昌德;林欢;韩凌霞;崔玉东;曲连东

作者机构：

关键词： 多杀性巴氏杆菌;外膜蛋白A;原核表达

期刊名称： 黑龙江八一农垦大学学报

ISSN： 1002-2090

年卷期： 2010 年 02 期

页码： 56-59

摘要： 根据已发表的Pm70株的序列(GenBank登录号:AE004439)设计了两对引物,用PCR方法扩增了鸭多杀性巴氏杆菌标准株C48-102的外膜蛋白基因A(ompA),扩增的片段为1062bp。将测序结果与GenBank中多杀性巴氏杆菌P52、PM70、T931317、T94289的ompA序列比对结果表明,核苷酸水平上同源性为89.0%～98.9%;在氨基酸水平上同源性为90.7%～99.2%。全ompA序列在大肠杆菌中干扰蛋白的正常表达,因此截断ompA蛋白的信号肽序列,将去信号肽的ompA基因插入到pPRO-EX-Htb载体上,构建了原核表达载体Htb-ompA,转化BL21,并诱导表达,SDS-PAGE结果表明,表达蛋白约为35kDa,与预期的分子量大小相符。Western-blot结果表明,表达的蛋白具有良好的抗原活性。本研究重组蛋白ompA的获得,为敲除ompA基因多杀性巴氏杆菌突变株的血清学检测奠定基础。

分类号： S852.61

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