不同品种忍冬ANR基因克隆、表达模式及原核表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 余永亮

作者： 余永亮;鲁丹丹;谭政委;杨红旗;李磊;许兰杰;杨青;董薇;安素妨;郭水柱;高松;梁慧珍

作者机构：

关键词： 忍冬;花青素还原酶;基因克隆;表达模式;原核表达

期刊名称： 药学学报

ISSN： 0513-4870

年卷期： 2023 年 58 卷 011 期

页码： 3449-3460

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 花青素还原酶(anthocyanidin reductase,ANR)是黄酮合成途径中的关键酶,该酶的催化活性对花青素含量有重要的调控作用.本研究根据忍冬转录组数据,设计特异性引物,克隆忍冬和红白忍冬ANR基因的CDS、gDNA及启动子序列.结果表明,从忍冬和红白忍冬克隆得LjANR和rLjANR的CDS序列均为1 002 bp,gDNA序列分别为2 017和2 026 bp,启动子序列分别为1 170和1 164 bp.LjANR和rLjANR均含有6个外显子和5个内含子,外显子长度一致,内含子差异较大,二者启动子序列中均含有大量光响应、激素应答、非生物胁迫应答元件.生物信息学分析发现,LjANR和rLjANR均编码333个氨基酸,均为稳定的疏水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽,二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲组成.序列比对及系统进化分析表明,LjANR和rLjANR蛋白与猕猴桃、茶树、油茶聚为一类,亲缘关系较近.qRT-PCR分析发现,LjANR和rLjANR均在花蕾中表达量最高,根中表达量最低,不同花期的表达量变化模式相似,S1和S2期表达量较高,然后表达量逐渐下降,至S4期达到最低,之后在S5期有一个缓慢的上升后表达量再次下降,两个品种中ANR基因的表达量在根、S2、S5期差异显著,茎、花蕾、S1、S3、S6期差异极显著.将LjANR基因构建到原核表达载体pET-32a上进行诱导表达,在59 kD处成功表达出目的蛋白.该研究为进一步研究ANR基因的功能奠定了基础,同时也为忍冬新品种的选育提供理论指导.

分类号： R931

  • 相关文献

[1]红花CtANR2和CtANR3基因的克隆、结构及表达模式分析. 鲁丹丹,谭政委,余永亮,李磊,许兰杰,杨红旗,杨青,董薇,安素妨,梁慧珍. 2023

[2]红花花青素还原酶基因ANR的克隆及表达分析. 鲁丹丹,谭政委,李磊,余永亮,许兰杰,杨红旗,董薇,梁慧珍. 2022

[3]甜菜夜蛾卵黄原蛋白多克隆抗体制备及其在不同发育时期蛋白表达. 赵静,孙洋,谭永安,肖留斌,姜义平,柏立新. 2017

[4]籽粒苋AhNAD-ME的序列特征与表达. 白云凤,聂江婷,张忠梁,李平,张维锋,闫建俊,冯瑞云,张耀. 2014

[5]'潘那利'番茄碱性螺旋环螺旋转录因子基因的克隆与表达分析. 胡佳蕙,王柏柯,李宁,余庆辉,王娟. 2022

[6]‘潘那利’番茄碱性螺旋环螺旋转录因子基因的克隆与表达分析. 胡佳蕙,王柏柯,李宁,余庆辉,王娟. 2022

[7]橡胶树胞质型谷胱甘肽还原酶基因的克隆与表达分析. 邓治,刘辉,王岳坤,李德军. 2014

[8]花生白藜芦醇合成酶基因PNRS1的克隆及其在原核中的表达. 韩晶晶,刘炜,毕玉平. 2010

[9]糙皮侧耳中产孢相关基因同源物stpo1的克隆及表达分析. 戚元成,李建立,邱立友,申进文,王瑞霞. 2016

[10]草莓FabHLH3基因克隆表达分析与过量和干涉表达载体的构建. 张青,苗立祥,张豫超,杨肖芳,蒋桂华. 2017

[11]青稞HbTsi1的克隆及其序列特征与表达特性分析. 曾兴权,王玉林,原红军,徐齐君,尼玛扎西. 2015

[12]四翅滨藜AcDREB2转录因子编码基因的克隆及其表达. 苟艳丽,高丽莉,吴欣欣,郭欢,包爱科. 2021

[13]水稻耐旱性基因OsERF65的克隆、表达及转录自激活活性分析. 赵慧,杨诗勤,徐凯,罗利军. 2021

[14]霸王环核苷酸门控通道基因ZxCNGC5的克隆及表达模式分析. 刘亚琪,王文颖,崔彦农,郭欢,李孟湛,王锁民. 2018

[15]冬瓜BhMAPK15基因的克隆及其非生物胁迫下的表达分析. 叶新如,王彬,陈敏氡,刘建汀,曾美娟,朱海生,温庆放. 2020

[16]半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)2种视黄酸受体RARα和RARγ克隆及组织表达特性. 宋雪松,徐永江,柳学周,史宝,王滨,刘永山,张雅星. 2018

[17]2个玉米ZmCRY1a基因的克隆及其响应光质处理的表达模式. 闫蕾,杨宗举,苏亮,肖阳,郭林,宋梅芳,孙蕾,孟凡华,白建荣,杨建平. 2016

[18]甘薯响应蔓割病病原菌侵染的IbWRKY7基因克隆与表达分析. 刘意,刘泓江,陈培茹,杨新笋,雷剑,王连军,柴沙沙,靳晓杰,杨圆圆,程贤亮,焦春海,张文英. 2022

[19]青稞法尼基转移酶β亚基编码基因HbERA1的克隆及表达分析. 原红军,曾兴权,王玉林,徐齐君,韦泽秀,尼玛扎西. 2014

[20]灰飞虱雌激素相关受体基因的克隆、序列分析及在氟啶虫胺腈胁迫下的表达模式. 徐鹿,赵春青,徐德进,徐广春,许小龙,张亚楠,韩召军,顾中言. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序