仙人掌总RNA提取方法的改进与分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 余乃通
作者: 周启林;罗志文;胡福初;张治礼;刘志昕
作者机构:
关键词: 仙人掌;RNA提取;RT-PCR;灵敏度检测
期刊名称: 广东农业科学
ISSN: 1004-874X
年卷期: 2017 年 44 卷 03 期
页码: 75-79
摘要: 利用亚硫酸钠分别与TRIzol试剂、RNA plant plus Reagent试剂、BioTeke多糖多酚植物总RNA提取试剂、艾德莱EASY spin Plus植物RNA快速提取试剂和OMEGA Plant RNA试剂结合的方法,均可获得高质量的仙人掌茎总RNA。反转录成cDNA,RT-PCR结果显示,5种方法提取的总RNA反转录后均能特异性扩增到matK基因。使用TRIzol试剂盒、RNA plant plus Reagent试剂盒和艾德莱EASY spin Plus植物RNA快速提取试剂盒提取RNA质量相对较高,在cDNA以1∶100稀释时能检测到matK基因;而使用BioTeke多糖多酚植物总RNA提取试剂盒或OMEGA Plant RNA试剂盒时,灵敏度稍低,在cDNA以1∶10稀释时,能检测到目的基因。利用亚硫酸钠结合不同植物总RNA提取试剂盒进行比较研究,为后续制备仙人掌茎高质量cDNA文库及其分子生物学研究奠定基础。
分类号: S682.33
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