猪轮状病毒G1P[7]株分离鉴定及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李素芬

作者： 李素芬;汤学超;周金柱;王丹丹;朱雪蛟;陶然;李运川;郭容利;张雪寒;李彬

作者机构： 南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 猪轮状病毒;分离鉴定;基因型;免疫原性,多克隆抗体

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2024 年 56 卷 004 期

页码： 101-107

收录情况： 北大核心

摘要： 旨在明确猪场腹泻原因并分离猪轮状病毒(PoRV).采集腹泻猪粪便,经RT-PCR检测为阳性的样品接种于单层细胞,通过细胞病变(CPE)和间接免疫荧光(IFA)来检测病毒增殖;RT-PCR扩增VP4 和VP7 基因并测序以确定G/P基因型,生物信息学软件分析VP4 和VP7 基因的遗传进化特征;传代病毒灭活后制苗接种家兔制备多克隆抗体,测定中和抗体,并经Western blot和IFA鉴定其特异性.结果:猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、伪狂犬病毒(PRV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)均为阴性,只有PoRV为阳性;过滤粪便样接种单层MA104 细胞,连续传5 代均可观察到以细胞圆缩、最后瓦解脱落为特征的CPE,IFA检测到PoRV的特异性荧光,表明病毒分离成功,命名为JSNJ2019;分离株连续传代,病毒滴度逐步升高,介于105~106.5 TCID50/mL;分离株JSNJ2019 为G1P[7]基因型;3 次免疫后家兔血清的中和抗体滴度最高可达 211,Western blot出现特异性条带且IFA荧光亮而特异.本研究成功分离PoRV JSNJ2019(G1P[7])且免疫原性良好,制备的多克隆抗体特异性强,为研究PoRV致病机制奠定基础.

分类号： S858.28

  • 相关文献

[1]猪轮状病毒的分子流行病学研究进展. 苗艳,朱庆贺,陈亮,李丹,李阳,兰世捷,徐馨,史同瑞. 2020

[2]产蛋下降鸭群强毒新城疫病毒的分离鉴定与分子特征. 胡北侠,王艳,杨少华,许传田,黄艳艳,张秀美. 2012

[3]仔猪轮状病毒感染与鉴别诊断. 肖芳萍,张晓辉,周升富. 2013

[4]猪轮状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 陈小金,陈建飞,时洪艳,张志榜,冯力. 2010

[5]一起新生仔猪传染性腹泻的诊断与防治效果观察. 夏伟,纪水莲,马迪杨,杨金雨,付朝阳,袁远. 2013

[6]2011—2017年浙江省猪病毒性腹泻病的流行病学调查. 徐丽华,李军星,苏菲,余斌,王赛,田瑞雨,袁秀芳. 2018

[7]PEDV、TGEV、PoRV和PKV多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 苗艳,陈亮,朱庆贺,李阳,兰世捷,徐馨,李丹. 2020

[8]猪轮状病毒NJ2012株VP8基因序列分析及原核表达. 常新见,周金柱,范宝超,郭容利,朱琳,赵永祥,牛家强,何孔旺,李彬. 2020

[9]华东地区猪病毒性腹泻感染状况调查. 张佩华,倪建平,缪德年,何锡忠,张春玲,蒋凤英,李春华. 2017

[10]猪轮状病毒性腹泻的ELISA双抗夹心法检测及防治建议. 王玲,蒲万霞,孟小琴,邓海平,崔东安,焦硕,杨志强. 2009

[11]猪轮状病毒Rotavirus A pig/China/NMTL/2009/G9P[23]株的分离与鉴定. 时洪艳,陈建飞,王承宝,张志榜,石达,冯力. 2011

[12]应用PRVVP6蛋白McAb间接免疫荧光法检测猪轮状病毒. 边亚娟,林长水,田志军,唐丽杰,王玉玲,张海峰,张炳丽,李一经. 2007

[13]猪轮状病毒VP4、VP7基因PFastbac1重组载体的构建及转染. 肖长峰,卢永红,易建中. 2013

[14]猪轮状病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 陈小金,陈建飞,时洪艳,张志榜,冯力. 2010

[15]PEDV-TGEV-RV三重PCR检测方法的建立. 邹云婧,梁中银,林密,袁万哲,孙继国. 2016

[16]A群猪轮状病毒JS株vp7基因序列分析. 高秀春,时洪艳,佟有恩,吴波平,孙东波,白兴华,陈建飞,冯力. 2007

[17]规模化猪场仔猪腹泻4种病原的感染情况调查. 陈强,曾丽莉,俞伏松,叶鼎承,杨金先,李艳虹,宋铁英. 2010

[18]猪轮状病毒SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 陈小金,陈建飞,时洪艳,张志榜,冯力. 2010

[19]仔猪轮状病毒性腹泻的研究进展. 王玲,蒲万霞,常惠芸,华兰英,索朗斯珠. 2006

[20]猪轮状病毒RotavirusApig/China/NMTL/2009/G9P[23]株的分离与鉴定. 时洪艳,陈建飞,王承宝,张志榜,石达,冯力. 2011

作者其他论文 更多>>

微信小程序