极细链格孢菌peaT1基因在毕赤酵母中的表达与功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘延锋

作者： 曾洪梅;玉山江;杨秀芬;毛建军;邱德文

作者机构：

关键词： peaT1;极细链格孢菌;毕赤酵母

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2009 年 25 卷 03 期

页码： 413-417

收录情况： 北大核心

摘要： 建立了在毕赤酵母(Pichiapastoris)中分泌表达PeaT1蛋白的技术。将来源于极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)的基因peaT1亚克隆至酵母分泌型表达载体pPIC9K,构建了重组表达载体pPIC9K-peaT1,分别用SalI或BglII酶切线性化后电击转入毕赤酵母GS115菌株中,经MD平板筛选、PCR鉴定获得整合有外源基因的重组菌株。在α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,PeaT1在酵母中大量表达并分泌到胞外,SDS-PAGE检测表明表达蛋白的表观分子量约为35kD。表达蛋白上清稀释液能诱导烟草产生对TMV的抗性,其枯斑数抑制率可达到30.37%。每升表达上清液经超滤浓缩和离子交换层析可纯化目的蛋白16.13mg,该纯化蛋白能显著地促进小麦幼苗的生长。

分类号： Q93`Q78

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