丝瓜SRAP反应体系的优化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 叶新如

作者: 叶新如;朱海生;温庆放;陈敏氡;林碧英

作者机构:

关键词: 丝瓜;体系优化;SRAP

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2016 年 14 卷 03 期

页码: 673-678

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以丝瓜基因组DNA为模板,对SRAP反应中主要五个影响因素d NTP浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、DNA模板浓度、Mg~(2+)浓度进行优化,建立丝瓜SRAP-PCR反应的体系。根据实验确定的最佳反应体系为25μL SRAP体系。25μL SRAP体系为:75 ng DNA,0.2 mmol/L d NTP,1.25 U Taq酶,0.16μmol/L的单条引物,2.0 mmol/L Mg~(2+),2.5μL 10×Buffer。选用33个丝瓜品种对所确立扩增体系及扩增程序进行验证,检测结果表现为扩增产物条带清晰明亮、亮度高、重复性好,表明本试验所确定的反应体系及反应程序适用于丝瓜的SRAP分子标记。

分类号: S642.4

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