柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子表面抗原基因(λMZ5-7)在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩红玉

作者： 韩红玉;黄兵

作者机构：

关键词： 柔嫩艾美耳球虫;第二代裂殖子;表达

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2001 年 0 卷 06 期

页码： 34-37

摘要： 将重组克隆质粒 (PGEM -λMZ)用EcoRI酶切后 ,电泳回收目的片段 ,克隆到经EcoRI酶切、CIAP处理的表达载体 pET - 2 8a中 ,转化大肠杆菌JM 10 9感受态细胞 ,得到的转化子经PCR鉴定和酶切分析 ,筛选出符合正确阅读框的重组子 ,构建成重组表达质粒 (PET -λMZ) ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)表达菌中成功地表达了含目的蛋白的融合蛋白 ,融合蛋白的分子量约 34KDa ,加入IPTG诱导 6h后 ,蛋白表达接近最高水平。表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化 ,SDS -PAGE检测为单一条带。经Western -blotting杂交实验 ,纯化出的目的蛋白能与兔抗E .tenella第二代裂殖子抗血清发生反应 ,说明MZP蛋白是E .tenella第二代裂殖子抗原蛋白 ,具有一定的免疫原性 ,为进一步研究重组疫苗创造了一定的条件

分类号： Q786

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