堆形艾美耳球虫巨噬细胞移动抑制因子的克隆和表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 阎晓菲

作者： 阎晓菲;韩红玉;黄兵;岳城;赵其平;姜连连;董辉;卞庆松;张建哲

作者机构：

关键词： 球虫;堆形艾美耳球虫;巨噬细胞移动抑制因子;克隆;表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2008 年 30 卷 11 期

页码： 856-860

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究扩增和克隆了堆形艾美耳球虫巨噬细胞移动抑制因子,并在大肠杆菌中表达出MIF重组蛋白。根据GenBank中的MIF mRNA序列,设计特异引物,采用PCR方法以堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库为模板扩增获得MIF基因,将MIF基因片段连接到原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET28a-MIF,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,对表达产物进行Western blot分析。结果从堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库中扩增出MIF基因片段,长度为709bp;经序列分析,扩增片段的核苷酸序列与GenBank中登录的MIF序列的同源性为99.5%;经SDS-PAGE检测表明重组质粒pET(28a)-MIF在大肠杆菌中以包涵体形式表达;Western blot分析证明堆形艾美耳球虫抗血清可与重组表达蛋白特异性结合。本研究结果为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

分类号： S852.7

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