含CMV卫星互补DNA外源抗病基因81-3番茄工程植株的获得

文献类型： 中文期刊

第一作者： 董春枝

作者： 董春枝;姜春晓;冯兰香;李树德;高振华

作者机构：

期刊名称： 中国蔬菜

ISSN： 1000-6364

年卷期： 1991 年 1 卷 01 期

页码：

摘要： 番茄是主要的栽培蔬菜之一,遭受黄瓜花叶病毒( Cucumber Mosaic Virus简称CMV)的严重为害。而现有的番茄品种和材料中,尚未有可利用的抗CMV基因,且无理想的防治药剂,加之该病毒可由蚜虫以非持久性方式传播,所以,长期以来常规育种和喷药治蚜等措施在生产上均未收到明显的防病增产效果。中国科学院微生物所吴世宜等(1989)首先把CMV的卫星 RNA的互补DNA (cDN)导入了G—140烟草和丽春番茄,使其对CMV的抗性有了不同程度的提高。通过这一途径,作者成功地将抗CMV的外源基因转入到81—3番茄的组织中,并获得了工程植株。 供试番茄(Lco夕ersfcon escu7en!U。)品种:sl—3。种子经常规方法表面消毒后,在MS基本培养基上生长1。一12天,切取无茵番茄苗的子叶与胚轴,在含抗 coy基因(卫星RNA的CDNA)的根癌农杆菌(Agrobacferi。m t。mofaciens)液中浸5～10分钟,在放有滤纸的MS基本培养基上共培养两天,然后转人附加500mg/Lgi%青霉素和20mg/L卡那霉素的分化培养基上,三周后再转人相同培养基,只是将粉令青霉素浓度降为200mg/L。当外植体分化的芽长到1～1.scm时切下生根,20天左右移栽。组培苗成活后,用不含卫星RNA的CA4 V强.毒株接种,置防虫温室中生长,20天后每株取2～3g叶片,提取ds—RNAi经聚丙烯酸胺凝胶电泳和银染色,观察分析工程植株中卫星RNA的表达。 迄今为止,经电泳检测,在获得的sl—3番茄的几批再生植株中,有七株体内含卫星ds—RNA,表明这七株都是转入了外源抗病基因的工程植株,其中部分植株已经结果,而且这些工程植株比对照植株(非转入基因的植株和由81—3番茄种子长成的正常植株)发病时间推迟10天左右,大多数工程植株只表现轻微花叶症状,而对用植株则基本上坏死或表现截叶、严重花叶。目前正在改进一些条件提高转化频率和进行后代的抗病性比较试验。含CMV卫星互补DNA外源抗病基因81-3番茄工程植株的获得@董春枝$中国农科院蔬菜花卉研究所 @姜春晓$中国农科院蔬菜花卉研究所 @冯兰香$中国农科院蔬菜花卉研究所 @李树德$中国农科院蔬菜花卉研究所 @高振华$中国农科院蔬菜花卉研究所

分类号：

  • 相关文献
作者其他论文 更多>>

微信小程序