尼罗罗非鱼1号染色体分离及文库构建方法研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 耿青

作者: 耿青;肖炜;李大宇;邹芝英;祝璟琳;杨弘

作者机构:

关键词: 尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus);1号染色体;显微分离;微克隆

期刊名称: 淡水渔业

ISSN: 1000-6907

年卷期: 2018 年 04 期

页码: 3-8

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为对象,采用体内注射植物血细胞凝集素(PHA)方式收集有丝分裂后期的鱼体头肾细胞,低渗法制片,运用激光显微分离获得尼罗罗非鱼1号染色体,分离后的单染色体通过特异性酶切和LA-PCR体外扩增,得到500~2 000 bp之间的DNA片段,并通过Southern blot和微卫星标记得到验证。扩增片段通过电泳回收、连接转化、感受态细胞培养等步骤构建尼罗罗非鱼1号染色体微克隆文库,克隆片段长度在300~600 bp之间。

分类号: S917.4

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