猪传染性胃肠炎病毒纯化方法的选择与优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蒋凤英

作者： 蒋凤英;邹勇;何锡忠;李春华;张春玲;王英;许宝华

作者机构：

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒;纯化;超速离心;饱和硫酸铵;聚乙二醇-6000

期刊名称： 江西农业学报

ISSN： 1001-8581

年卷期： 2010 年 22 卷 08 期

页码： 129-131

摘要： 利用超速离心、饱和硫酸铵、聚乙二醇-6000(PEG-6000)对猪传染性胃肠炎细胞毒进行纯化,收集纯化病毒测定蛋白含量,分别运用PCR方法和作为ELISA包被抗原方法对纯化的效果进行检测,并对最佳纯化方法进行优化。3种纯化方法获得的蛋白浓度分别为1.875、6.435、0.763 mg/mL。PCR检测结果显示PEG-6000纯化后在上清液中未检出病毒,其余2种上清中均检出病毒。3种纯化方法制备的包被抗原ELISA试验阴阳性比值(P/N)分别为2.21、1.27、2.25,最终选择PEG-6000作为纯化病毒的方法,其最佳优化参数为PEG-6000浓度8%、浓缩时间2 h、NaCl浓度1%。研究表明利用PEG-6000纯化TGEV是一种经济实用、操作简单、并有较高纯化效率的方法,纯化后的TGEV为后续建立特异、敏感、快速的ELISA检测方法奠定了良好基础。

分类号： S858.28

  • 相关文献

[1]鸡胚来源的外泌体不同提取方法比较. 李莹,瞿浩,何静怡,刘天飞,王劼,王艳,舒鼎铭,罗成龙. 2020

[2]超速离心和酸沉淀制备牛乳清的蛋白质组学研究. 齐云霞,赵小伟,黄冬维,蔡东东,杨永新,程广龙,赵辉玲. 2019

[3]不同等电点沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白的双向电泳分析. 陈静廷,卜登攀,马露,杨永新,李发弟. 2014

[4]猪骨骼肌肌内脂滴分离和纯化方法的探究. 闫峻,马衍旋,穆淑琴,唐湘方,郑梓,李宁,刘陈龙,李千军,孙超. 2019

[5]适于基因组测序的高纯度的大豆线粒体基因组DNA提取方法. 李玉秋,张春宝,赵洪锟,谭化,费晓燕,赵丽梅,董英山. 2015

[6]不同方法提取牛奶乳清蛋白的双向电泳分析. 陈静廷,卜登攀,马露,杨永新,李发弟. 2014

[7]猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒混合感染的PCR检测. 于晓龙. 2006

[8]猪传染性胃肠炎病毒sM基因反义逆转录病毒的包装和鉴定. 于晓龙. 2005

[9]猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒荧光RT-PCR鉴别检测方法建立与应用. 王慧珊,高志强,王金宝,张鹤晓,乔彩霞,吴亚琼,邢佑尚,朱淑芬. 2011

[10]紫甘蓝花色苷组成及抗猪传染性胃肠炎病毒活性分析. 雷用东,魏向利,罗小玲,童军茂,赵晓燕. 2015

[11]2011—2017年浙江省猪病毒性腹泻病的流行病学调查. 徐丽华,李军星,苏菲,余斌,王赛,田瑞雨,袁秀芳. 2018

[12]PEDV、TGEV、PoRV和PKV多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 苗艳,陈亮,朱庆贺,李阳,兰世捷,徐馨,李丹. 2020

[13]猪传染性胃肠炎病毒LY86株N基因序列分析及病毒在猪睾丸细胞上的增殖特性研究. 杨元奇,季艳杰,张金秋,苗晋锋. 2017

[14]猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在毕赤酵母中的分泌表达. 康雪燕,张莉,姜世金,张培君. 2010

[15]紫甘薯花色苷制备及其抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)活性的研究. 雷用东,陈姗姗,赵晓燕,张莉,马越,童军茂. 2012

[16]shRNA表达质粒体外防治猪传染性胃肠炎病毒感染. 周俊芳,华修国,崔立,朱建国,缪德年,邹勇,何锡忠,苏万国. 2009

[17]猪传染性胃肠炎病毒S蛋白主要抗原位点在昆虫细胞中的表达. 李菁,何孔旺,杨倩. 2009

[18]猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点的克隆及原核表达载体的构建. 张春叶,沈红,张莉,李焕荣,路苹. 2008

[19]TGEV细胞培养物超速离心与RT-PCR扩增的研究. 蒋凤英,何锡忠,王英,李春华,钱永清,邹勇. 2007

[20]猪传染性胃肠炎病毒在ST细胞中增殖规律的研究. 周燕,王建超,华平,邹勇,谭文松. 2005

作者其他论文 更多>>

微信小程序