牛副流感病毒3型抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 杨建乐
作者: 杨建乐;赵贵民;侯佩莉;王洪梅;李杰;何洪彬
作者机构:
关键词: 牛副流感病毒3型;NP-HN基因;原核表达;酶联免疫吸附试验;抗体检测
期刊名称: 动物医学进展
ISSN: 1007-5038
年卷期: 2016 年 37 卷 11 期
页码: 19-24
收录情况: 北大核心
摘要: 旨在建立牛副流感病毒3型(BPIV3)抗体间接ELISA检测方法。克隆NP-HN截短串联基因并构建原核表达载体pET28a(+)-NP-HN,诱导纯化NP-HN重组蛋白作为包被抗原,优化ELISA反应条件,建立BPIV3抗体间接ELISA检测方法,进一步与病毒中和试验和进口ELISA试剂盒进行比较,应用本方法对270份临床血清样本进行了检测。结果表明,表达的NP-HN重组蛋白大小为44ku,具有良好的反应原性,建立的ELISA检测方法特异性强,与牛的主要呼吸道病原如牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等均无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数小于8%,与病毒中和试验和进口商品化ELISA试剂盒的总符合率分别为96.67%和98.89%。对采自山东、辽宁和天津的270份临床血清样本检测后总的阳性率为82.59%(223/270)。建立的BPIV3抗体间接ELISA方法具有较好的特异性和敏感性,可应用于BPIV3的流行病学调查和抗体检测研究。
分类号: S852.653
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