猪源伪狂犬病病毒变异株AH02LA株细菌人工染色体的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘娅梅

作者： 刘娅梅;乔永峰;顾一奇;柳畅;许梦微;王志胜;郭容利;张传建;侯继波;王继春

作者机构：

关键词： 伪狂犬病病毒;变异株;猪源;细菌人工染色体;生长特性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2018 年 10 期

页码： 880-885

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建猪源伪狂犬病病毒(PRV)变异株AH02LA的细菌人工染色体(BAC),本研究将转移载体pHA2-pUC19-H1-H2的DNA与PRV AH02LA株基因组DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行同源重组,利用转移载体中的GFP为筛选标记,获得携带GFP基因的gE/gI基因缺失突变株PRV-AH02LA(gE-/gI-)-pHA2。提取纯化的该重组病毒DNA转化E.coli DH10B,对获得的阳性克隆命名为BAC~(PRV-G)。提取BAC~(PRV-G)的DNA,将含gE、gI和其上下游同源片段的DNA与BAC~(PRV-G)的DNA共转染CEF,获得gE、gZ基因恢复的病毒命名为PRVAH02LA~(Rec)。比较亲本株PRV AH02LA、基因缺失株和恢复株的生长动力学,结果表明,恢复株的生长特性与亲本株无显著差异。本研究成功构建了PRV变异株AH02LA的BAC,并证实其为全基因组的感染性克隆,为PRV变异株的致病机理研究和新型疫苗研制提供了重要的平台。

分类号： S852.651

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