鉴别检测兔出血症病毒1型、2型双抗体夹心ELISA方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈兴继

作者： 陈兴继;魏后军;范志宇;胡波;宋艳华;陈萌萌;仇汝龙;葛雷;王芳

作者机构：

关键词： 兔出血症病毒;双抗体夹心ELISA;单抗;鉴别检测

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN：

年卷期： 2023 年 024 期

页码： 161-167

收录情况： 北大核心

摘要： 为实现对兔出血症病毒1型（RHDV1）和兔出血症病毒2型（RHDV2）的有效鉴别诊断，从而有效预防和控制兔出血症，将抗RHDV广谱单抗2A11作为捕获抗体包被于ELISA板，以HRP标记的抗RHDV1特异性单抗1D4、抗RHDV2特异性单抗6B3分别作为检测抗体，经条件优化，建立了鉴别检测兔出血症病毒1型、2型的双抗体夹心ELISA方法，并进行敏感性、特异性试验，对送检的60份兔肝脏样品用该双抗体夹心ELISA方法和RT-PCR方法进行检测，比较这2种方法的符合率。结果显示，该双抗体夹心ELISA方法的最佳工作条件为：捕获抗体浓度为4μg/mL,2种HRP标记的检测抗体的浓度均为0.5μg/mL;判定标准为：以检测抗体HRP-1D4检测样品D值＞0.195判为RHDV1阳性，以检测抗体HRP-6B3检测样品D值＞0.166判为RHDV2阳性；通过特异性和敏感性试验发现，该双抗体夹心ELISA方法具有较强特异性和较高敏感性。检测60份送检的兔肝脏样品，发现本方法与RT-PCR方法相比，检测RHDV1阳性样品的符合率为100%（9/9）,RHDV2阳性样品的符合率为82.61%（19/23）,阴性样品的符合率为87.5%（28/32）,总符合率为93.33%（56/60）,且该方法阳性样品检出率高于RT-PCR方法。本研究建立的双抗体夹心ELISA方法可有效地鉴别检测RHDV1和RHDV2这2种不同基因型的病毒，为兔出血症的流行病学研究提供有力的技术支撑。

分类号： S852.65

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