基于酿酒酵母的多片段质粒的构建

文献类型: 中文期刊

第一作者: 汤雅萍

作者: 汤雅萍;程毅;王吐虹;陈佳;高春生;郭利桃;宋志强;唐超;严准;李智敏

作者机构:

关键词: 质粒构建;多片段质粒;酵母同源重组系统

期刊名称: 湖南农业大学学报(自然科学版)

ISSN: 1007-1032

年卷期: 2023 年 49 卷 004 期

页码: 421-427

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为避免现有的多片段质粒构建技术的弊端,提高多片段质粒构建效率,以构建树干毕赤酵母Agglutinin-like基因的敲除载体为例,利用酿酒酵母活体细胞重组系统,一次性将多个外源 DNA片段和线性化质粒重组,形成环状质粒.通过引物设计在相互连接的DNA片段之间引入 50 bp重叠序列,用PCR扩增DNA片段后,与线性化质粒一起转化酿酒酵母,再用 PCR 和测序等方法鉴定阳性酵母菌落中质粒的正确性.通过本方法构建的多片段质粒正确率高、耗时短.

分类号: Q782

  • 相关文献

[1]内蒙古绒山羊Wnt10b干扰载体的构建及鉴定. 吴子贤,吴静,王荣,周健,王瑞雪,刘俊阳,刘佳森,赵艳红. 2021

[2]新城疫病毒HN基因真核细胞定位表达的重组质粒的构建. 隋红,李曦,张永欣,肖晶,符芳,李乐静,白玉贤. 2009

[3]提高核酸疫苗免疫效果的策略. 张继乐,张杰,刘永生,高云英,孙德惠. 2008

[4]表达绿色荧光蛋白重组乳酸杆菌的构建及电击转化条件. 田兴山,张玲华,周风珍,李国立,孙晓刚. 2005

[5]酵母双杂交 BBTV DNA2 ORF诱饵质粒构建及其互作蛋白筛选. 余乃通,王健华,张雨良,周朋,刘志昕. 2015

[6]口蹄疫病毒样颗粒诱导表达型载体的构建及其BHK-21细胞池的筛获. 谭书桢,董虎,孙世琪,郭慧琛. 2023

作者其他论文 更多>>