兔出血症病毒特异性核酸适配体的筛选

文献类型: 中文期刊

第一作者: 焦美会

作者: 焦美会;刘家森;姜骞;陆涛峰;胡小亮;蒋艳妹;曲连东

作者机构:

关键词: 兔出血症病毒;适配体;SELEX技术

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2017 年 25 卷 02 期

页码: 9-13

收录情况: 北大核心

摘要: 为筛选出兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)衣壳蛋白VP60特异性核酸适配体,建立新型的兔出血症(rabbit hemorrhagic disease,RHD)检测方法,本研究构建了一个长80 nt的随机寡核苷酸文库。以固定在PVDF膜上的VP60为靶分子,使用消减SELEX技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment)进行20轮的筛选,以生物素标记的次级文库作为"一抗",以辣根过氧化物酶标记的链酶亲和素作为"二抗",对文库进行Western blot鉴定,结果表明第20轮文库存在可特异性的识别VP60的核酸序列。随机选取第20轮文库的46条序列克隆、测序,得到20个高度同源序列,同时对46个适配体再次鉴定,最终得到3个特异性识别VP60的适配体。

分类号: S852.659.6

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