牛病毒性腹泻病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩猛立

作者： 韩猛立;李娜;黄新;薄新文;王新华;赵玉龙;钟发刚

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;RT-nPCR;检测;应用

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2010 年 19 卷 10 期

页码： 6-9+15

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 参照多株不同基因型和基因亚型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR相对保守的基因序列,设计3对引物,其中1对能够扩增不同基因型BVDV 5′UTR片段(288 bp),另2对分别能够扩增BVDV-1型和BVDV-2型5′UTR片段(195 bp和116 bp)。扩增片段大小与预计片段一致。对PCR反应条件进行优化,建立了一种特异、敏感的RT-nPCR检测方法。敏感性试验表明,敏感性为10-2TCID50/mL。特异性试验表明,对猪瘟兔化弱毒疫苗株、牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒的检测结果均为阴性。通过对新疆部分地区无BVD临床症状的牛场208份奶牛血样检测,阳性率为50.43%,表明该方法具有快速、简便、特异性强和灵敏度高等特点,可以作为BVDV隐性感染临床诊断的有效方法。

分类号： S852.65

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