牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的截短表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李娇

作者： 李娇;薛飞;朱远茂;祖立闯

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;E2蛋白;截短表达;鉴定

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2008 年 30 卷 03 期

页码： 200-205

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)BA株接种MDBK细胞,提取病毒RNA。参照已发表的BVDV基因组序列,利用Oligo 6生物学软件设计扩增E2基因的1对引物,引入酶切位点并去掉E2蛋白的跨膜区及疏水区。通过RT-PCR扩增了长约1 000 bp的E2基因片段,克隆到pMD18-T载体上,酶切并测序鉴定。然后将目的片段进一步定向克隆到pET30a表达载体,转化BL21表达菌。取转化菌培养,并用IPTG诱导,获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白变性、纯化和复性后,用免疫印迹与间接ELISA检测表明纯化的重组蛋白具有良好的免疫原性,为牛病毒性腹泻病毒诊断试剂的研制奠定了基础。

分类号： S852.65

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