猪瘟病毒NS3蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 常天明

作者： 常天明;孙元;李宏宇;贺番;李淼

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;NS3基因;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2010 年 02 期

页码： 144-149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以含有猪瘟病毒(CSFV)石门株全长cDNA的重组质粒pOKShimen为模板,经PCR扩增获得NS3基因,利用原核表达载体pMAL-c2X、pET32a以及杆状病毒表达载体pFastBacH T B表达CSFV石门株NS3基因,获得3种重组蛋白:MBP-NS3、His-NS3和rNS3。Western-blot分析及间接免疫荧光试验证实,这3种不同载体表达的NS3蛋白均能被猪瘟阳性血清所识别。利用直链淀粉树脂柱对重组蛋白MBP-NS3进行纯化后,用其免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA筛选,获得2株能稳定传代并分泌针对抗CSFVNS3蛋白单克隆抗体的细胞株,命名为1D10和1H10。Western-blot分析及间接免疫荧光试验结果证明,这2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均可识别CSFVNS3蛋白。

分类号： S852.659.6

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