苏云金芽胞杆菌Sigma K在大肠杆菌中的表达与纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨敏

作者： 彭琦;黄闽忠;考桂伟;张杰;宋福平

作者机构：

关键词： 苏云金芽胞杆菌;Sigma K蛋白;生物活性;转录调控

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2016 年 43 卷 01 期

页码： 69-75

收录情况： 北大核心

摘要： 【目的】在大肠杆菌中表达纯化苏云金芽胞杆菌HD73的转录调控因子Sigma K(σK)。【方法】PCR扩增出苏云金芽胞杆菌HD73中sig K基因的ORF(Open reading frame)装载到带有His标签的表达载体p ET21b上,转入到表达菌株BL21(DE3)中获得重组菌株BL21(p ETsig K),通过SDS-PAGE、镍柱亲和纯化、阴离子交换纯化和凝胶迁移实验(EMSA)等方法对Sigma K蛋白进行提取、纯化和生物活性分析。【结果】正确表达出大小约为27 k D的His-Sigma K蛋白,并获得了纯化的蛋白。EMSA结果表明纯化的His-Sigma K蛋白可以与受其控制的cry1Ac基因启动子结合。【结论】表达和纯化了His-Sigma K蛋白,His-Sigma K具有与受其控制的启动子结合的功能。

分类号： S476.1`Q78

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