草鱼TBK1基因荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张林

作者: 张林;张浪;周剑光;甘金华;张涛;何力

作者机构:

关键词: 草鱼;TBK1基因;18S rRNA基因;荧光定量PCR;双标准曲线

期刊名称: 中国渔业质量与标准

ISSN: 2095-1833

年卷期: 2022 年 006 期

页码: 9-14

摘要: TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)基因在天然抗菌免疫中发挥重要作用,为研究该基因在草鱼(Ctenopharyngodon idella)抗病天然免疫中的表达水平,本研究根据已报道的草鱼TBK1基因(ciTBK1)序列,设计特异性引物2对,基于ciTBK1和18S rRNA双标准曲线建立了荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测方法。结果表明,建立的标准曲线Ct(Cycle thrshold)值与模板浓度的对数呈现良好的线性关系(R~2均大于0.99),建立的qRT-PCR检测方法能特异地定量检测ciTBK1基因,检测灵敏度可达50拷贝/μL,且组内及组间变异系数均小于5%。所建立的qRT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。[中国渔业质量与标准,2022,12(6):09-14]

分类号: S917.4

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