猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体的制备及其中和活性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李淑红

作者： 李淑红;刘平黄;孙慧敏;仇华吉;李素

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;E2蛋白;猪源化单克隆抗体;悬浮培养

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2023 年 002 期

页码： 223-228

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本实验室前期制备了1株分泌针对猪瘟病毒（CSFV）E2蛋白鼠源单克隆抗体的杂交瘤细胞株6E10,并验证其可特异性识别CSFV E2蛋白。由于杂交瘤细胞不稳定且不易储存，本研究将6E10抗体的轻、重链可变区基因和猪源抗体的恒定区基因融合并克隆至慢病毒表达载体pFUGW,分别构建了携带Strep标签的重组猪源化抗体轻、重链基因的慢病毒质粒pFU-p6E10-LC-Strep和pFU-p6E10-HC-Strep,进一步制备了慢病毒Lenti-p6E10-LC-Strep和Lenti-p6E10-HC-Strep,将二者共转导至HEK293S悬浮细胞，成功表达并纯化了重组猪源单克隆抗体6E10（p6E10）。经ELISA试验及Western blot证实，p6E10抗体能特异性识别E2蛋白。中和试验结果显示，p6E10抗体可以中和CSFV石门株。结果表明，本研究成功获得了针对CSFV E2蛋白的重组猪源化单克隆抗体p6E10,为深入研究CSFV E2蛋白的结构和功能以及开发新型诊断制剂奠定了基础。

分类号： S852.651

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