产纤维素酶大肠杆菌工程菌的构建和酶的表达
文献类型: 中文期刊
第一作者: 陈小玲
作者: 芦志龙;吴仁智;陈英;黄俊;陆琦;陈东
作者机构:
关键词: 纤维素酶;大肠杆菌;酶活;异源表达
期刊名称: 基因组学与应用生物学
ISSN: 1674-568X
年卷期: 2019 年 006 期
页码: 2620-2626
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了使大肠杆菌(Escherichia coli)具备生产纤维素酶的能力,从铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)PKC-001克隆碱性纤维素酶基因,进行密码子优化后连到载体pET-22b,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,对工程菌进行表达优化并分析纤维素酶酶活.结果表明大肠杆菌工程菌能生产分子量约39 kD的纤维素酶,在培养温度20℃、摇床转速170 r/min、IPTG终浓度0.01 mmol/L的条件下,纤维素酶的产量最大;在酸性条件下,细胞内和细胞外的滤纸酶活力(FPA)分别为5.78 U/mL和1.13 U/mL,在碱性条件下检测不到滤纸酶活.显然,重组纤维素酶仅在酸性条件下有活力.
分类号: Q78
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