锦鲤疱疹病毒主要囊膜蛋白基因的PCR扩增与序列分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谭爱萍

作者： 谭爱萍;邹为民;赵飞;姜兰;陈信廉;劳海华;简清;陆小萏;罗理

作者机构：

关键词： 锦鲤疱疹病毒;主要囊膜蛋白基因;序列分析;原核表达载体

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2008 年 15 卷 05 期

页码： 880-884

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了进一步研究锦鲤疱疹病毒主要囊膜蛋白(KHV-MEP)的功能及锦鲤疱疹病毒(KHV)的感染机制,根据KHV-MEP基因序列设计并合成1对引物,从自然感染KHV发病的锦鲤(Cyprinus carpio Koi)肝组织总DNA中扩增获得特异性基因片段。将所得基因片段克隆到pMD18-T Simple Vector载体中,获得重组质粒T-KMEP;酶切鉴定后进行序列测定,并采用氨基酸亲水性分析软件TMpred对其编码氨基酸序列进行分析;在对该片段所编码氨基酸可能抗原位点分析的基础上,进行PCR改造构建原核表达载体,获得重组表达载体pBV-KMEP1和pBV-KMEP2。所获得的基因片段大小为771bp,该基因片段与GenBank中已登录的KHV-MEP基因(AB178537)的同源性为100%,是一个完整的开放阅读框,所编码的蛋白由256个氨基酸组成,分子量为28.2kD,等电点(PI)为8.65。该序列含有4个跨膜区,可构成主要抗原决定簇。结果显示所获得的目的基因片段就是锦鲤主要囊膜蛋白全基因。

分类号： S941

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