新生仔猪大肠杆菌性腹泻K_(88ac)-ST_1-LT_B三价基因工程灭活疫苗候选菌株的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 卫广森

作者： 卫广森;许崇波;王文成;李尚波;王卓;苗玉和

作者机构：

关键词： K88ac基因;ST1基因;LTB基因;融合基因;融合蛋白;基因表达

期刊名称： 第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集（上）

ISSN：

年卷期： 2005 年

页码： 9

收录情况： CSCD

摘要： 利用PCR和基因定点突变技术,从大肠杆菌C83902的质粒中扩增出K88ac基因、ST1突变基因和LTB基因,通过分离、纯化、限制性核酸内切酶酶切、连接和转化,构建了含K88ac-ST1-LTB融合基因表达载体的重组菌株BL21(DE3)(pXK88acST3LT5)。经酶切鉴定和DNA序列分析证实,构建的重组质粒pXK88acST3LT5中含有Kssac-ST1-LTB融合基因,且基因序列和阅读框架均正确。经ELISA检测,重组菌株表达的K88ac-ST1-LTB融合蛋白能够被ST1单抗、LTB和K88ac抗体识别。经乳鼠灌胃试验证实,表达的融合蛋白已丧失天然ST1肠毒素的毒性。免疫实验结果...

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