烟草T-DNA插入位点侧翼序列扩增方法的筛选与优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘慧

作者： 刘慧;刘贯山;刘峰;龚达平;张雪峰;崔萌萌;路铁刚;王元英

作者机构：

关键词： 烟草;T-DNA;插入位点;侧翼序列;筛选

期刊名称： 中国烟草科学

ISSN： 1007-5119

年卷期： 2014 年 35 卷 01 期

页码： 96-101+107

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 烟草T-DNA激活标签插入突变体库的创制过程中,需要进行大量的T-DNA插入位点的侧翼序列扩增,因此选择一种适用于烟草T-DNA侧翼序列扩增的高效方法尤为必要。本研究比较了TAIL-PCR、PCR-walking、FPNI-PCR三种方法对T-DNA插入位点侧翼序列的扩增效率、插入位点确定的比例和同源蛋白比对结果,并对3种方法的PCR程序、体系和引物设计等方面进行了优化,确定TAIL-PCR更适合烟草的侧翼序列扩增,通过产率、条带长度、插入位点和同源蛋白比对结果的比较,得出TAIL-PCR更适合烟草的侧翼序列扩增。这一结果为应用烟草突变体开展烟草基因功能的研究奠定了基础。

分类号： S572

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