基于FMV 35S的数字聚合酶链式反应方法定量检测转基因作物

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘奕君

作者： 刘奕君;闫伟;龙丽坤;马月;何禹璇;赵宁;李飞武;张斯童

作者机构：

关键词： 转基因;筛选标记;数字PCR;FMV 35S;定量检测

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2024 年 011 期

页码： 278-284

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 以含有FMV 35S标记基因的大豆转化体MON87705为材料，利用实时聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,real-time PCR）和数字PCR（digital PCR,dPCR）技术，建立一种转基因作物的定量检测方法。通过real-time PCR法对扩增体系测试，建立的检测方法对FMV 35S标记基因具有高度特异性；利用双重微滴式dPCR进行定量检测参数的测定，结果表明：在基因组DNA 0.005～20 ng/μL质量浓度范围，靶标基因的测量拷贝数与理论拷贝数具有良好的线性关系；dPCR方法对FMV 35S标记基因的检出限可达到5 copies，定量限为0.1%。利用两个dPCR平台，对不同含量的转基因作物的盲样进行测定，内标准基因和外源特异性片段的双重、三重测定，均获得准确的定量结果，数据可靠，再现性良好。因此本研究建立的基于筛选标记基因FMV 35S的转基因dPCR定量检测方法在满足转基因成分定量检测标准的参数要求的同时，能够进一步提高检测效率，可为转基因作物成分定量提供一种准确、简便的检测技术。

分类号： TS210.7

  • 相关文献

[1]基于PCR技术的植物病原菌分子定量检测技术研究进展. 曹学仁,周益林. 2020

[2]数字PCR在转基因定量检测中的研究进展. 斯能武,李俊,武玉花,吴刚,张丽. 2021

[3]HPT-mCherry融合标签在水稻转基因筛选鉴定中的应用. 陈娟,周洁,严成其,王栩鸣,杨勇,余初浪,程晔,陈剑平. 2013

[4]食用菌遗传转化研究进展. 郭丽琼,陈守才,林俊芳. 2001

[5]抗磺酰脲类除草剂基因用于转基因油菜筛选标记. 陈松,浦惠明,彭琦,张维,周晓婴,胡茂龙,付三雄,张洁夫. 2023

[6]无筛选标记转基因作物的硏究进展. 陈扬勋,张治国,路铁刚. 2012

[7]萎锈灵抗性分子标记及其在食用真菌遗传转化中的应用. 尚俊军,唐利华,万佳宁,杨瑞恒,龚明,汪滢,邹根,鲍大鹏. 2021

[8]无筛选标记转基因作物的研究进展. 陈扬勋,张治国,路铁刚. 2012

[9]鸟苷酸环化酶基因(AtGTPCHI)转化甜玉米研究. 祁喜涛,张春义,吴景,梁秋菊,杨婷,胡建广. 2012

[10]利用柱头涂抹法进行西瓜外源DNA导入的研究. 马双武,王吉明,尚建立,包文风,韦小敏. 2009

[11]数字PCR技术及其在检测领域的应用. 冯秀晶,易红梅,任星旭,任佳丽,葛建镕,王凤格. 2020

[12]数字PCR技术的发展与展望. 孙华伟,张敬峰,张小飞. 2020

[13]肉类及肉制品中动物源性成分鉴别方法研究进展. 纪艺,陈笑芸,丁霖,汪小福,彭城,徐晓丽,徐俊锋. 2020

[14]数字PCR和荧光定量PCR诊断急性期布鲁菌病的灵敏度比较初步研究. 韩冰,吴翠萍,赵芯,刘贵明,蒋荣猛. 2019

[15]基于单拷贝核基因的数字PCR定量检测肉制品中羊源性成分. 赵新,陈锐,刘娜,王一衡,刘双,李瑞环,王永,兰青阔. 2021

[16]转基因玉米MIR604基体标准物质研制. 李俊,李亮,李夏莹,宋贵文,沈平,张丽,翟杉杉,柳方方,吴刚,张秀杰,武玉花. 2020

[17]数字PCR技术在核酸标准物质研制中的应用. 郑子繁,柳方方,刘卫晓,金芜军,李亮. 2020

[18]耐除草剂转基因大豆SHZD32-1数字PCR绝对定量方法的建立. 郑子繁,王颢潜,高佳奇,陈硕,柳方方,张秀杰,李亮. 2023

[19]基于核酸分子学方法的肉类成分鉴别技术研究进展. 王金斌,李文,白蓝,刘华,蒋玮,吴潇,王荣谈,唐雪明. 2017

[20]数字PCR和荧光定量PCR检测转基因番木瓜中外源基因拷贝数方法的建立及其应用. 谢秀菊,夏启玉,刘帅,麦贤俊,贾瑞宗,郭安平,徐志胜,李峰,孔祥义,赵辉. 2024

作者其他论文 更多>>

微信小程序