细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31的GST融合蛋白原核表达及纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张立民

作者： 张立民;傅玉才;由弘;王进成

作者机构：

关键词： 细粒棘球绦虫;EgA31融合蛋白;疫苗

期刊名称： 寄生虫与医学昆虫学报

ISSN： 1005-0507

年卷期： 2003 年 10 卷 03 期

页码： 134-138

摘要： 目的 :构建细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31重组质粒 ,表达及纯化EgA31 GST融合蛋白 ,为疫苗的研究奠定基础。方法 :PCR扩增EgA31cDNA ,将得到的cDNA经限制性内切酶酶切 ,然后亚克隆入pGEX 5X 3质粒 ,转化BL2 1宿主菌 ,IPTG诱导重组质粒的表达 ,亲和层析纯化表达产物 ,Bradford法测定重组蛋白含量 ,用SDS PAGE和Westernblot进行分析鉴定。结果 :SDS PAGE显示分离纯化的EgA31 GST融合蛋白为 4 5kDa ,测序检验重组质粒中EgA31cDNA序列正确。EgA31 GST融合蛋白免疫豚鼠得到的抗血清可与细粒棘球绦虫原头蚴总蛋白在 6 6kDa处特异性反应。结论 :EgA31 GST融合蛋白获得高效表达 ,并成功纯化 ,初步实验证明具有良好的免疫原性 ,可用于进一步疫苗的免疫注射实验

分类号： R392

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