DHAV-3弱毒活疫苗株(HB80株)与野毒株鉴别检测的RT-PCR-RFLP方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 傅秋玲

作者： 傅秋玲;万春和;焦文龙;韩相敏;程龙飞;陈珍;赖志;陈红梅;梁齐章;江南松;刘荣昌;施少华;陈翠腾;苏敬良;黄瑜;傅光华

作者机构：

关键词： 鸭3型甲肝病毒;野毒株;弱毒疫苗株;聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法;鉴别

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2025 年 47 卷 007 期

页码： 691-696

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种能快速、简便、准确鉴别检测我国鸭3型甲肝病毒（DHAV-3）野毒株与弱毒活疫苗HB80株的方法，本研究根据DHAV-3野毒株及HB80株的2A基因序列差异片段设计并合成一对特异性引物，经反应条件的优化，初步建立了鉴别检测我国DHAV-3野毒株与HB80株的反转录聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（RTPCR-RFLP）方法。利用该方法检测DHAV-3野毒株和疫苗株，以及DHAV-1、鸭3型星状病毒、H9亚型禽流感病毒、禽坦布苏病毒、鸭瘟病毒、鸭3型腺病毒、鸭呼肠孤病毒和番鸭细小病毒，结果显示该方法仅能特异性扩增DHAV-3（包括野毒株和疫苗株）的682 bp片段，且仅DHAV-3野毒株的RT-PCR产物（682 bp片段）能够被Apa I酶切为444 bp和238 bp两个片段。将DHAV-3的RNA 10倍倍比稀释（1.7×10～6拷贝/μL～1.7×10～1拷贝/μL）后作为模板，利用该方法检测，结果显示该方法能够检出DHAV-3 RNA的最低浓度为170拷贝/μL。重复性结果显示，该方法对3个不同浓度DHAV-3野毒株和HB80株RNA的检测结果均一致。利用该方法和常规RT-PCR方法同时对疑似临床鸭肝炎组织、实验感染DHAV-3野毒株（HB株）和免疫DHAV-3活疫苗株鸭组织等101份样品检测，结果显示两者检测结果的符合率为100%。本研究首次建立了能特异性鉴别检测DHAV-3野毒株与我国弱毒活疫苗株的RT-PCR-RFLP方法，为我国鸭DHAV-3感染的防控提供了技术支撑。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法的建立. 兰德松,顾贵波,侯振中. 2018

[2]伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株微滴数字PCR鉴别方法的建立. 兰德松,魏澍,顾贵波,侯振中. 2018

[3]鸭3型甲肝病毒的分离鉴定与VP1基因序列分析. 焦文龙,傅秋玲,林永强,刘友生,刘荣昌,梁齐章,江南松,万春和,程龙飞,陈红梅,林建生,傅光华,黄瑜. 2024

[4]马传染性贫血病毒白细胞弱毒疫苗株及其亲本毒驴强毒株前病毒基因组比较分析. 王雪峰,姜成刚,郭巍,项伟,吕晓玲,赵立平,王凤龙,孔宪刚,张晓燕,邵一鸣,周建华. 2008

[5]EIAV弱毒疫苗株和强毒株诱导的特异性体液免疫应答差别. 朱振营,林跃智,王宇宏,赵立平,朱远茂,周建华. 2009

[6]猪繁殖和呼吸综合征病毒GP3蛋白粮基化位点突变株的构建及其生物学特性分析. 刘欢欢,周艳君,姜一峰(等. 2011

[7]猪伪狂犬病毒野毒株SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR诊断试剂盒的研制. 余波,周思旋,谭诗文,徐景峨,史开志,杨莉. 2014

[8]山羊痘病毒疫苗株和野毒株ORF121基因比较分析. 赵俊皓,张克山,卢炳州,王文芳,郑海学,刘湘涛,胡永浩. 2017

[9]2021年广东省猪流行性腹泻病毒分子监测和部分S基因序列分析. 陈胜男,胡柱祺,林金森,邵洋洋,钟汝情,张杰,谢莹,焦思思,欧阳慧敏,卢嘉贤,许伟锋,邹育根,张建峰,翟少伦. 2022

[10]单核细胞增生李斯特菌野毒株prfA基因的克隆及其分子特征分析. 孟庆玲,乔军,才学鹏,骆学农,陈创夫. 2011

[11]犬瘟热病毒野毒株与疫苗株鉴别检测RT-LAMP方法的建立. 杨天阔,刘大飞,姜骞,张洪英,曲连东. 2012

[12]检测猪瘟病毒野毒株胶体金免疫层析方法的建立. 王向鹏,孙元,杨增岐,仇华吉. 2010

[13]伪狂犬病毒TK/gE双基因缺失突变株(rPRV-LacZ)对猪和绵羊安全性和免疫原性的研究. 田志军,仇华吉,童光志. 2005

[14]羊传染性脓疱病毒疫苗株和野毒株VIR基因的比较分析. 王玲玲,刘永杰,郑海学,张克山,刘湘涛. 2016

[15]弓形虫野毒株ROP5蛋白基因的克隆、表达及反应原性研究. 乔军,杨松涛,高玉伟,秦川,华育平,王立刚,刘丹,王玮,周明,夏咸柱. 2008

[16]水貂肠炎病毒疫苗株和野毒株PCR-RFLP鉴别方法的建立. 王建科,程世鹏,杨莘,易立,许红丽,程悦宁,师新川,武华,闫喜军. 2012

[17]EIAV强毒株和弱毒疫苗株gp90基因差异与免疫原性关系研究. 王雪峰,杨彬,王帅,林跃智,吕晓玲,赵立平,王凤龙,周建华. 2008

[18]猪伪狂犬病毒变异株全长基因组测序及遗传演化分析. 张青占,童武,刘飞,郑浩,周艳君,童光志. 2013

[19]羊口疮病毒疫苗株与野毒株VIL-10基因的比较分析. 冯倩,吴锦艳,陈妍,刘永杰,张克山,尚佑军,刘湘涛. 2018

[20]鉴别诊断犬细小病毒疫苗毒和野毒株PCR-RFLP方法的建立. 易立,程世鹏,王建科,罗彬,杨莘. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序