利用柞蚕核型多角体病毒表达系统表达谷氨酰胺果糖-6-磷酸酰胺转移酶
文献类型: 中文期刊
第一作者: 朱彤
作者: 朱彤;赵振军;叶博;刘宇博;范琦;张嘉宁;李文利
作者机构:
关键词: 柞蚕;谷氨酰胺果糖-6-磷酸酰胺转移酶;柞蚕核型多角体病毒表达载体系统
期刊名称: 蚕业科学
ISSN: 0257-4799
年卷期: 2020 年 004 期
页码: 478-484
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 谷氨酰胺果糖-6-磷酸酰胺转移酶(glutamine:fructose-6-phosphate amidotransferase,GFAT)是己糖胺生物合成途径(HBP)中的限速酶,与蛋白质糖基化修饰密切相关。本研究克隆的柞蚕GFAT基因(ApGFAT)CDS由2 022个碱基构成,编码674个氨基酸。将该基因连接到柞蚕杆状病毒转移载体pApM748BE后与ApNPV-Δph/egfp+共转染Tn-High Five细胞获得重组病毒。将重组病毒注射到柞蚕蛹体内,收集发病蛹血淋巴,用镍离子螯合柱纯化得到纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测表明,ApGFAT蛋白在柞蚕蛹体内得到成功表达,酶活力为0.978μmol/(min·mg)。
分类号: S885.1
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