畜禽养殖粪污中典型致病菌的三重微滴式数字PCR定量检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 程深伟

作者： 程深伟;张克强;梁军锋;刘福元;郜兴亮;杜连柱

作者机构：

关键词： 养殖粪污;沙门氏菌;大肠埃希氏菌;金黄色葡萄球菌;三重微滴式数字PCR

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2022 年 38 卷 009 期

页码： 271-280

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为精准、快速检测畜禽养殖粪污中典型致病微生物,减少人畜共患病的传播风险,以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌(O157:H7)和肠炎沙门氏菌3种常见致病菌为研究对象,通过筛选其特异性引物与探针、优化反应系统,建立起快速、稳定的多重微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)反应体系.通过检测不同菌株验证该体系的特异性,并确定畜禽养殖废弃物致病菌的检出限,开发出多重微滴数字PCR快速检测方法.研究结果表明,各对引物探针对目标菌株均能扩增,ddPCR体系内未出现交叉反应,检测肠炎沙门氏菌的绝对定量检测低限为0.68 copies/μL;检测金黄色葡萄球菌的绝对定量检测低限为0.79 copies/μL;检测大肠埃希氏菌的绝对定量检测低限为1.02 copies/μL.研究建立的方法可实现对畜禽养殖粪污中3种典型致病菌的高效率、高精度的检测.

分类号： S852.6

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