间接竞争时间分辨荧光免疫分析法检测稻米中Cry1C毒素

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐重新

作者： 徐重新;杨晶祎;陆梦晓;仲建峰;张存政;张霄;何鑫;刘媛;刘贤金

作者机构：

关键词： Cry1C毒素;多克隆抗体;稻米;时间分辨荧光免疫分析

期刊名称： 南京农业大学学报

ISSN： 1000-2030

年卷期： 2014 年 37 卷 06 期

页码： 44-48

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析(CI-TRFIA)方法,用于稻米中Cry1C毒素的残留检测。通过4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,并用饱和硫酸铵沉淀和Protein A柱纯化,测定抗体效价;以制备Eu-N1标记的羊抗兔IgG作为检测抗体,建立Cry1C毒素的CI-TRFIA检测方法,并进行抗原类似物的特异性分析和Cry1C毒素在稻米中的添加回收试验。结果表明:获得的多克隆抗体质量浓度为3.86 mg·mL-1,效价为1∶48 000;建立的CI-TRFIA检测方法,其灵敏度(IC10)为0.074 ng·mL-1,中抑制浓度(IC50)为60.16 ng·mL-1,线性检测范围(IC20~IC80)为0.96~1 633.60 ng·mL-1;对Cry1B、Cry1Ab和Cry1Ac均有一定的交叉反应;添加回收试验的批内、批间回收率为84.53%~107.12%,变异系数为6.05%~11.24%。结论:该检测方法稳定性和重复性较好,可以满足Cry1C毒素的检测要求。

分类号： TS210.7`O657.3

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