嵌合卵清蛋白-兔出血症VP60蛋白病毒样颗粒在杆状病毒表达系统中的表达及其鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谭晖

作者： 谭晖;胡波;陈萌萌;范志宇;魏后军;宋艳华;王芳

作者机构：

关键词： 兔出血症病毒(RHDV);VP60蛋白;卵清蛋白;sf9细胞;病毒样颗粒(VLPs)

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2013 年 29 卷 02 期

页码： 352-358

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用卵清蛋白(OVA)第257～264位氨基酸替换兔出血症病毒的主要结构蛋白质VP60不同位置处相应数量的氨基酸,研究了氨基酸的替换对VP60蛋白表达及病毒样颗粒装配的影响。通过重叠延伸剪接术(SOE)法,OVA T-细胞表位(257～264位氨基酸)分别取代VP60 3个区域(502～510位氨基酸、411～417位氨基酸、302～309位氨基酸),得到3种重组嵌合VP60基因。利用杆状病毒表达系统,得到3种重组穿梭载体Bacmid,分别命名为Bacmid-V-1、Bacmid-V-2、Bacmid-V-3。将重组阳性质粒转染Sf9昆虫细胞,得到3种重组病毒rBac-v-1、rBac-v-2、rBac-v-3,3组重组病毒感染Sf9细胞后表达的3种蛋白质分别命名为Z1、Z2和Z3。经RT-PCR、IFA、SDS-PAGE、Western blot等方法鉴定后,利用电镜观察此3种重组蛋白质病毒样颗粒的形成情况。3种重组嵌合VP60蛋白在Sf9昆虫细胞中得到表达,3种重组嵌合蛋白质均可以形成与VP60蛋白类似的病毒样颗粒。

分类号： S858.291

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